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公司新聞

栓塞性腦梗死動物模型

1 犬腦栓塞模型

(1)復制方法  取狗靜脈血同一定比例的凝血酶混合,快速吸人內(nèi)徑0.8mm的玻璃管內(nèi),垂直放置在4℃,待血塊完全收縮后通過頸動脈插管至頸內(nèi)動脈水平段,注入血栓

(2)模型特點  經(jīng)血管造影證實,該方法可形成可靠的大腦中動脈栓塞(MCAO),并可用于溶栓**研究,但操作方法較復雜。


2 兔腦栓塞模型

2.1 耳動脈栓子

(1)復制方法  健康家兔1只,雌雄不拘。用改良腰穿針穿刺兔耳動脈,搔刮損傷約2cm長的血管內(nèi)膜,損傷段動脈近端部分結扎。24h后切除形成血栓的動脈段,在顯微鏡下取出栓子,剪成若干個0.5mm×0.5mm片段,取3個片段注入頸內(nèi)動脈(ICA)。

(2)模型特點  該栓子是在動脈內(nèi)膜受損后形成的,富含纖維蛋白和血小板,與人類動脈粥樣硬化形成的血栓相似,更適合溶栓**的研究。其缺點是栓子制備時間長,制作方法較復雜。用組織型纖溶酶原激活物(tPA)和尿激酶溶栓的成功率分別只有38%和35%,使其應用受到限制。


2.2 含放射性標記物的栓子

(1)復制方法  用兔全血與凝血酶、氯化鈣及放射性標記物混合為單個栓子制成MCAO,通過頭顱X線平片及放射性檢測來確定栓子的部位及溶栓的效果。

(2)模型特點  該方法避免了多次血管造影造成的動物死亡,使操作更簡單省時。


3 大鼠腦栓塞模型

大鼠是用于腦栓塞模型*廣泛的為研究對象。其原因是:①價格低廉。②近親繁殖、品種純化,腦血管解剖變異小。③腦血管解剖及生理接近人類。④動物存活時間長,能進行腦缺血病理過程的研究。⑤血管損傷部位恒定,實驗重復性好。常用的大鼠血栓栓塞性腦梗死模型如下:


3.1 微栓子懸液

(1)復制方法  大鼠雌雄不拘。大鼠心臟取血,室溫下放置48h形成血栓,用注射器抽吸血凝塊注入生理鹽水中,重復3次形成小栓子懸液。抽吸0.2ml(栓子100~250μm)從頸總動脈(CCA)注入ICA,可形成腦內(nèi)多發(fā)性腦梗死。

(2)模型特點  該模型形成的梗死比例高,而且注入感染的栓子還可進行腦膿腫的研究。其缺點為,栓子部位不恒定,無法預測梗死部位及范圍;小栓子易進入外周的分支漂流至整個的動脈樹而引起雙側大腦半球多處小面積梗死;除大腦中動脈、前脈絡膜動脈栓塞外,常伴有大腦前動脈和大腦后動脈的小面積梗死,甚至有對側梗死,與人類卒中不符;由于側支循環(huán)的影響使組織缺血程度不一,不利于組織定量分析。


3.2 幾個規(guī)則小栓子

詳見局灶性腦缺血模型中血栓法。此方法優(yōu)勢明顯,是常用的血栓栓塞法。其不足之處在于,因栓子數(shù)目較多(14~16個),ICA顱內(nèi)段被完全堵塞,導致大腦動脈(Willis)環(huán)后半部不通而不能由同側動脈注入溶栓**。但若用較少的血栓則易發(fā)生自溶。

有學者進行了方法的改進,即將抗凝的動脈血離心后取血小板含量低的血漿與一定比例的凝血酶和氯化鈣溶液混合,制成栓子,將其剪成2mm的小段,依次吸入6個血栓從頸外動脈(ECA)注入ICA。該模型的優(yōu)點是:①血栓富含纖維蛋白,因用了血小板含量低的血漿,血栓不再發(fā)生收縮,制備好后不需放置,可立即注入體內(nèi)造成MCA0而不發(fā)生自溶。②只需一次麻醉動物,手術操作時間短。③用6個這樣血栓正好行成MCAO而不會堵住發(fā)出大腦前動脈之前的頸內(nèi)動脈,從而保證了大腦動脈(Willis)環(huán)后半部的暢通;④該模型可重復性好,能形成穩(wěn)定的MCAO,成功率幾乎達100%。


3.3 小鼠腦栓塞模型

(1)復制方法  將股動脈血抽入一PE-50管內(nèi),室溫下放置2h,4℃放置22h,然后剪下5cm栓子吸入一個充滿鹽水的40cm PE-10管,管的兩端各連接一個有生理鹽水的注射器,使鹽水反復通過PE-10管,制成一富含纖維素的單栓子。常規(guī)方法分離一側CCA、ICA和頸外動脈ECA,結扎ECA遠端,微血管夾暫時夾閉CCA、ICA。將一個外徑為0.15~0.18mn2的導管輕輕由ECA插入ICA 8mm(距 MCA起始段1.0~1.5mm),注入栓子。

(2)模型特點  該模型的優(yōu)點:①大血管栓塞與人類卒中類似。②在體外模擬動脈壓力及循環(huán)制成的栓子富含纖維蛋白和血小板(白色血栓),可用于溶栓研究。③可重復性強,可預測供血區(qū)梗死體積。其缺點為注入血栓時操作難度較大,蛛網(wǎng)膜下腔出血發(fā)生率較高(40%)。

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