一、服務(wù)介紹
細胞遷移是指細胞在接收到遷移信號或感受到某些物質(zhì)的梯度后而產(chǎn)生的移動。細胞遷移為細胞頭部偽足的延伸、新的黏附建立、細胞體尾部收縮在時空上的交替過程。細胞遷移是正常細胞的基本功能之一，是機體正常生長發(fā)育的生理過程，也是活細胞普遍存在的一種運動形式。胚胎發(fā)育、血管生成、傷口**、**反應、炎癥反應、動脈粥樣硬化、癌癥轉(zhuǎn)移等過程中都涉及細胞遷移。檢測細胞遷移能力的實驗包括劃痕實驗和Transwell實驗。
二、實驗原理
細胞劃痕實驗是簡捷測定細胞遷移運動與修復能力的方法，在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細胞上，用微量槍頭或其它硬物在細胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線，去除中央部分的細胞，然后繼續(xù)培養(yǎng)細胞至實驗設(shè)定的時間是一種簡單易行的檢測細胞運動的方法，實驗成本低，可以用來檢測貼壁生長腫瘤細胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。Transwell的基本原理是將transwell小室放入培養(yǎng)板中，小室內(nèi)稱為上室，培養(yǎng)板內(nèi)稱為下室，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔，上室內(nèi)添加上層培養(yǎng)液，下室內(nèi)添加下層培養(yǎng)液。將細胞種在上室內(nèi)，由于膜有通透性，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細胞，從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細胞生長、運動等的影響。
三、實驗流程
劃痕實驗
1. 用marker筆在6孔板背后均勻得劃橫線；
2. 在孔中加入細胞；
3. **天用槍頭垂至于背后的橫線劃痕；
4. 用PBS洗去處劃下的細胞，培養(yǎng)不同時間，取樣，拍照；
5. 數(shù)據(jù)處理：每個時間點細胞整體遷移距離=每個時間點距離長度-0時距離；
6. 結(jié)果統(tǒng)計分析。
Transwell實驗
1. 采用未鋪 Matrigel 膠的 Transwell 小室用于實驗；
2. 制備細胞懸液；
3. 接種細胞；
4. 檢測穿過的細胞數(shù)；
5. 結(jié)果統(tǒng)計分析。
四、客戶提供
細胞株(凍存株或培養(yǎng)好的細胞)，所需藥品，**處理方式和濃度。
五、公司提供
基本實驗步驟、圖片、數(shù)據(jù)分析結(jié)果、剩余藥品。
實驗周期：大約2-3周左右，具體需要根據(jù)細胞生長情況及實驗內(nèi)容而定。