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ELISA樣本稀釋的原則

ELISA樣本稀釋的原則如下:
在查詢背景知識(shí),或者通過預(yù)實(shí)驗(yàn),確認(rèn)了樣本濃度過高,需要進(jìn)行稀釋,就要根據(jù)以下原則,嚴(yán)謹(jǐn)操作和計(jì)算。
1、稀釋倍數(shù)合理。稀釋后樣本測(cè)定的OD值,要求落在標(biāo)準(zhǔn)品高值OD值的半量程內(nèi),假定標(biāo)準(zhǔn)品高值的OD值是2.4,那么稀釋后的樣本,OD值接近1.2,在這個(gè)范圍附近,計(jì)算的濃度值為準(zhǔn)確,以這個(gè)結(jié)果乘以稀釋倍數(shù),得到的樣本濃度準(zhǔn)確。
2、稀釋過程規(guī)范。特別是大倍比的稀釋,zui 好是梯度稀釋。比如樣本要稀釋200倍,就先稀釋10倍,再在10倍稀釋的基礎(chǔ)上,再進(jìn)行稀釋20倍,得到200倍。
3、樣本取樣量不要太小。在樣本充足的情況下,樣本取樣量不要低于5uL,越低的取樣量,在混勻取樣過程中,誤差越大。